醫院無菌實驗室建設標準要求，無菌實驗室主要用于微生物學、生物醫學、生物化學、動物實驗、基因重組和生物制品等領域，統稱為潔凈實驗室或生物安全實驗室。一般無菌室是一個4-5平方米、2.5米高的獨立小房間(與外界隔離)，專門設置在微生物實驗室內，可以用板材和玻璃搭建。無菌室外應設置緩沖室，門的開啟方向不正確，防止氣流帶入雜菌。無菌室和緩沖室必須封閉，室內通風設備必須有空氣過濾器。在獲得無菌環境和無菌材料后，只有保持無菌狀態，才能對特定的已知微生物進行研究。因此，控制細菌的能力和穩定性是無菌室的核心驗收指標。

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無菌室建設與設計規范：

1.二級及三級無菌室符合中華人民共和國衛生行業標準:WS233-2002 《微生物和生物醫學實驗室生物安全通用準則》。
2.二級（P2）無菌室為萬級、局部百級，符合目前世界通用的美國聯邦209E標準。 二級無菌室包含高、中、初效過濾系統，小型中央空調系統，層流送風，井式回風。更衣間及風淋室采用人體自動感應系統。
3.各系統技術指標如下：更衣間及操作間送風口風速≥0.3米/秒,風淋室風速≥15米/秒,操作間與環境靜壓差≥5Pa,系統噪聲≤60dB.
4.三級（p3）無菌實驗室除具有二級無菌室的特點外,還專門設立了電子互鎖門、傳遞窗門互鎖、環氧樹脂自流平地面、下水消毒設施。配置二級生物安全柜，實驗室及緩沖間均為負壓空間，實驗間的相對壓強為-30Pa—-40Pa，緩沖間的相對壓強為-15Pa—-20Pa。

無菌室建設的設計要求：

1．工作室應矮小、平整，面積只需4米2左右，高2.2—2.3米，內部裝修應平整、光滑，無凹凸不平或棱角等，四壁及屋頂應用不透水之材質，便于擦洗及殺菌。
2．室內采光面積大，從室外應能看到室內情況。
3．為保證無菌室的潔凈，醫院無菌室周圍需設緩沖走廊，走廊旁再設緩沖間，其面積可小于無菌室。
4．無菌室、緩沖走廊及緩沖間均設有日光燈及供消毒空氣用紫外燈，殺菌紫外燈離工作臺以1米為宜 ，其電源開關均應設在室外。
5．無菌室與緩沖間進出口應設拉門，門與窗平齊，門縫要封緊，兩門應錯開，以免空氣對流造成污染。
6．無菌室的使用與管理

1） 無菌室應保持清潔整齊，室內僅存放最必須的檢驗用具如酒精燈、酒精棉、火柴、鑷子、接種針、接種環、玻璃鉛筆等。
2） 室內檢驗用具及凳桌等保持固定位置，不隨便移動。
3） 每2—3周用2%石炭酸水溶液擦拭工作臺、門、窗、桌、椅及地面，然后用3%石炭酸水溶液噴霧消毒空氣，最后紫外燈殺菌半小時。
4） 定期檢查室內空氣無菌狀況，細菌數應控制在10個以下，發現不符合要求時，應立即徹底消毒滅菌。 無菌室無菌程度的測定方法：取普通肉湯瓊脂平板、改良馬丁培養基平板各3個（平板直徑均9厘米），置無菌室各工作位置上，開蓋曝露半小時，然后倒置進行培養，測細菌總數應置37℃溫箱培養48小時；測霉菌數則應置27℃溫箱培養5天。細菌`霉菌總數均不得超過10個為 。
5） 無菌室殺菌前，應將所有物品置于操作之部位（待檢物例外），然后打開紫外燈殺菌30分鐘，時間一到，關閉紫外燈待用。
6） 進入無菌室前，必須于緩沖間更換消毒過的工作服、工作帽及工作鞋。
7） 操作應嚴格按照無菌操作規定進行，操作中少說話，不喧嘩，以保持環境的無菌狀態。